Проводка приспособлена нами к карусельному процессору фирмы Leica ТР1020, которым мы с удовольствием пользуемся уже несколько лет. Возможно, можно и на других или вручную.
Станция |
Реагент |
Экспозиция |
1 |
50%-ный водный раствор изопропилового спирта |
1 час. |
2 |
Абсолютированный изопропанол |
30 мин. |
3 |
Абсолютированный изопропанол |
30 мин. |
4 |
Абсолютированный изопропанол |
30 мин. |
5 |
Абсолютированный изопропанол |
1 час. |
6 |
Абсолютированный изопропанол |
1 час. |
7 |
Абсолютированный изопропанол |
2 час. |
8 |
Абсолютированный изопропанол |
3 час. |
9 |
Абсолютированный изопропанол |
3 час. |
10 |
Парафин |
1 час. |
11 |
Парафин |
3 час. |
12 |
Парафин |
4 час. |
Итого |
|
20 час.30 мин. |
Примечание: использовать только абсолютированный 99,7° и выше изопропанол.
Также хорош (даже несколько лучше) химически чистый изопропанол (ХЧ).
Другие не годятся, снижение градусности резко – катастрофически снижает качество препаратов.
Никаких добавок к спирту мы не применяли.
Данный вариант
проводки позволяет провести в течение
суток в 1-ной корзине до 400 (!)
кусочков органов (секционный материал – т.е. крупных по площади, но толщиной до
Биопсии проходят быстрее.
Увеличение времени пребывания в спиртах свыше указанного не улучшает и не ухудшает качества препаратов. Критично время пребывания в парафине – его уменьшение существенно ухудшает пропитывание кусочков и средина вываливается. Это время при возможности можно увеличивать.
При замене спиртов – на 1 шаг назад. Одновременно заменяется 50% изопропанол (смесь с водой готовится из чистого спирта !). Менять - по мере загрязнения. Но после проводки более 300 кусочков – обязательно.
Мы использовали биовитрумовский Histomix.
Данная проводка по качеству выше ксилольной и ацетоновой, почти аналогичная хлороформенной, но имеется существенная экономия на реагентах, так как исключается промежуточная среда.
Не надо бояться напрямую опускать кусочки из изопропанола в парафин(!), также как из хлороформа или ксилола, минуя «каши»