Формалиновый
осадок может присутствовать в тканях после фиксации в простом формалине (с
кислой pH). Он коричневый,
обычно внеклеточный, однако может присутствовать на макрофагах. Это
коричневый, гранулярный, устойчивый депозит, отмечаемый внутри и внеклеточно в тканях, которые были фиксированы простым
раствором формалина.
Формалиновый осадок известен как кислый гематин
формальдегида, так как образуется из гемоглобина
под действием формальдегида в кислой среде. В связи с тем, что он
образуется из гемоглобина, он часто наблюдается в кусочках с большим
количеством крови, где простой формалин может привести
в его образованию за довольно короткий период. Также имеется тенденция у
образованию формалинового пигмента в тканях при длительном хранении в формалине,
если раствор формалина регулярно не заменяется на свежий.
Образование данного артефакта может быть устранено в
большинстве случаев использованием в качестве фиксатора нейтрального забуференного
формалина. Нейтральный или слабо щелочной формалин может
эффективно остановить его образование.
В малых количествах пигмент не мешает исследованию, но
в большом – затрудняет.
Формалиновый осадок может быть удален из срезов:
А)
с помощью спиртового раствора аммония:
Состав реагента:
1.
95% этанол – 50
мл;
2.
Концентрированный
гидроксид аммония (28%) - 15 мл.
Реактивы смешиваются перед использованием.
Методика:
1.
Депарафинировать срезы;
2.
Поместить в спиртовой раствор аммония (до 1 часа);
3.
Тщательно промыть
водой (желательно проточной);
4.
Окрашивать по обычным методикам (в том числе
гематоксилином и эозином).
Литература:
1. Cook H C, Manual
of Histological Demonstration Techniques. P. 243. Bancroft JD & Stevens, Theory and Practice of Histological Techniques, 2nd Edition. p. 69.
Б) с
помощью сатурированного спиртового раствора пикриновой кислоты
Состав реагента:
1.
Абсолютный этанол;
2.
Пикриновая кислота.
Методика:
1. Депарафинировать срезы
ксилолом, провести их через спирты до воды.
2. Поместить срезы в сатурированный раствор пикриновой
кислоты на несколько минут (до 1 часа);
3. Для обесцвечивания срезов от окраски пикриновой
кислотой использовать сатурированный водный раствор крабоната
лития;
4. Хорошо промыть водой;
5. Окрашивать обычными методами.
Литература:
1. Drury, R.A.B. and Wallington,
E.A., (1980) Carleton's histological
technique Ed. 5. Oxford University Press, Oxford, UK.
2. Kiernan.
J.A., (1999) Histological
and histochemical methods: Theory and practice, d.3 Butterworth Heinemann, Oxford, UK.
В) с помощью 1% содового раствора на
абсолютном этаноле. Однако этот метод
приводит к отслоению срезов от предметного стекла. Поэтому он на практике не
используется.